图1 对苯二胺标样图谱

图2 邻苯二胺标样图谱

样品中对苯二胺检测结果

样品中邻苯二胺检测结果

表二 实际样品的分析结果

表三 样品重现性(n=6)

自1999年卫生部发布我国第一部《化妆品卫生规范》以来，到2007年7月1日卫生部颁布实施的《化妆品卫生规范》(2007年版)，已是第三次修订《化妆品卫生规范》。规范列出了染发类化妆品中允许使用的96种染发剂原料，并明确了它们的限制使用要求和标签标注规定。染发产品的安全性极为重要，染发剂中一些染料的使用有可能对皮肤产生致癌作用。如：邻苯二胺、间苯二胺及它们的N位取代衍生物及其盐类，属于化妆品中禁用组分；对苯二胺及其N位取代衍生物均为化妆品组分中限用物质，其在化妆品中最大允许浓度为6％(以游离基计)，限用于染发用氧化着色剂，一般使用时，产品标签上必须注明本品含“苯二胺类”。2009年1月5日，央视曝光多个品牌的“一洗黑”洗发水，实际上就是添加但未标明加入了“对苯二胺”（可致癌）的染发剂。由于洗发水的使用频率高，长期累积，很容易对消费者的健康安全造成威胁。
　　本文采用《化妆品卫生规范》所规定的液相色谱标准检测方法，对氧化型染发剂中包括对苯二胺和邻苯二胺在内的八种染料进行检测。

仪器概况
　　本实验使用岛津Prominence LC-20A高效液相色谱仪系统。具体配置为LC-20AB二元泵，DGU-20A3在线脱气机，SIL-20A自动进样器，SPD-M20A二极管阵列检测器，CBM-20A lite控制器和LCSolution色谱工作站。

分析方法
色谱柱：Shimadzu Shim-pack VP-ODS 4.6×150mm 5μm
检测波长：280nm
流动相：乙腈:（水:三乙醇胺＝98:1）＝5:95
流速：1mL/min
柱温：室温
进样量：10μL
洗脱方式：等度洗脱。

试剂与标样
对照品：a.对苯二胺 b.邻苯二胺 c.对苯二酚 d.4－氨基苯酚 e.2，5－二氨基甲苯 f.间苯二酚 g.4－甲胺苯酚
试剂：a.乙醇 b.磷酸 c.三乙醇胺 d.乙腈 f.亚硫酸钠

样品前处理方法: 称样（准确称取样品约0.2g置于已加入1%亚硫酸钠溶液0.4mL的10mL具塞比色管）－－＞定容（用流动相定容至刻度）－－＞超声（超声提取１５min)－－＞离心（上清液用0.45um滤膜过滤备用

分析结果
1..标准品色谱图
图1和图2为本方法检测对苯二胺和邻苯二胺标样的色谱图。
       
                  图1 对苯二胺标样图谱                                     图2 邻苯二胺标样图谱
由图1和2可见，对苯二胺和邻苯二胺保留时间分别为3.11min和8.69min。

2.方法检出限
方法检出限结果如表1所示。

 

 

表1 方法检出限

3.实际样品分析结果
　　按本方法测定含对苯二胺和邻苯二胺的实际样品，得到的图谱如图3和图4所示。全部样品的分析结果见表2。
              
            图3 样品中对苯二胺检测结果                                  图4 样品中邻苯二胺检测结果

 

 

表2 实际样品的分析结果

4.重现性连续
6次进样重现性结果如表3所示。

表3 样品重现性(n=6)

 结论

　　在上述色谱条件下，七种染料的保留时间合适，峰形对称，理论塔板数和分离度均符合测定要求，重复多次进样峰面积的相对标准偏差均<2％。该色谱条件适用于化妆品中包括对苯二胺和邻苯二胺在内的七种染料的测定。

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